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本用于动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的线粒体的制备。其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能稳定。

本试剂盒线粒体的分离原理基本上采用：第一，通过机械方法破裂细胞；第二，通过低速差速离心去除残渣碎屑和巨大细胞器；第三，通过高速差速离心获得线粒体。

1. 为保证获得完整的线粒体:
   
   1. 第一是全程低温操作，将样品管放在冰水浴而不是碎冰块中。
      
   2. 第二是快速:微量制备比大规模制备操作更方便和快速，因而更容易获得完整的线粒体。
      
   3. 第三是在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞是制备线粒体的最关键环节。与组织块相比，培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁，因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。在相差显微镜下检查未裂解细胞应在50%左右即可。过度研磨将破坏线粒体，研磨不足将降低得率。
2. 以离心力g计算正确的离心速度，不同的离心机可据此精确计算离心速度。
   
3. 进行Western Blot和2D-胶电泳，可直接加入样品缓冲液裂解线粒体。
   
4. Medium Buffer、Suspension Buffer、Store Buffer短期内(1～2周)可存放4℃，若长期不使用需-20℃冻存。

1. 样本处理
   
   1. 组织匀浆：称取100～200mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干，用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内，控制组织压积在100μL左右，加入0.6～0.8mL冰预冷的Lysis Buffer(6倍组织压积)，4℃冰浴上下研磨组织20次；
      
   2. 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800×g，5～10min离心收集细胞。计数。每次提取需要5×10⁷个细胞，加入0.6～0.8mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞(6倍细胞压积)，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0～4℃ ℃冰浴用间隙严密的研杵研磨细胞30～40次；
2. 将组织或细胞匀浆物转移到含0.2mL Medium Buffer的干净离心管中，温和混匀，4℃，1200×g离心5min。细胞核、大的膜碎片、未裂解细胞沉在管底；重复次操作步骤一次，弃掉沉淀。
   
3. 转移上清液到干净的空离心管中，4℃，7000×g离心10min，移去上清液后，所得沉淀即为线粒体。
   
4. 以0.3mL的Suspension buffer重悬线粒体沉淀，4℃，9500g离心5min，再次沉淀线粒体；
   
5. 用50～100μL Store Buffer或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀，(50μL/每100mg组织，100μL/5×10⁷个细胞)立即使用或?80℃保存。